JM(人T淋巴细胞白血病细胞)(STR鉴定正确)

　　名称JM(人T淋巴细胞白血病细胞)(STR鉴定正确) 　　背景描述T-cell line derived from the peripheral blood of a 14-year old male with T-cell leukemia.JM is isolated from the same patient as Jurkat。JM has the ability to grow HIV. 　　种属人 　　年龄（性别）男；14岁 　　组织来源外周血 　　生长特性悬浮细胞 　　细胞形态淋巴细胞样 　　细胞类型肿瘤细胞 　　肿瘤类型白血病细胞 　　生物安全等级1 　　生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S 　　推荐传代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 　　推荐换液频率2~3次/周 　　倍增时间~35.2 hours 　　冻存条件 　　冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO 　　温度：液氮 　　培养条件 　　气相：空气，95%；CO2，5% 　　温度：37℃ 　　注意事项该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。 　　细胞培养步骤： 　　1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 　　2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 　　1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 　　1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 　　2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。